안녕하세요, 이번에는 분자 생물학에서 굉장히 중요한 실험 재료이자 꽃인 Plasmid에 대해 간단히 포스팅해보려합니다.
Plasmid는 일반적으로 실험실에서 Vector 또는 Construct라고 부릅니다.
Vector라는 단어는 운반체라는 뜻이 있기 때문이고 Construct는 구조, 구조체라는 뜻을 가지고 있어서 그런 것 같습니다.
Vector는 처음에 Bacteria에서 발견되었는데요, Bacteria의 gene 과는 다르게 small, circular gene이라는 특징을 가지고 있습니다. Bacteria의 endogenous gene과는 다르죠.
오늘 날의 Vector는 많은 modification을 거쳐서 분자 생물학에서 세포에 특정 단백을 발현시키거나 RNA들을 발현시키는 역할을 합니다.
아주 쉬운 방법으로 유전자 조작을 할 수 있는 것이죠
Vector의 기본 요소들입니다.
기본 요소에 대해 설명하자면
Selectable Marker
- Host Cell에 주입된 후 주입된 cell들을 골라내기 위한 Marker gene
ex) Puromycin, Blasticidin, Hygromycin
Antibiotic Resistance Gene
- Bacteria에 주입된 후 주입된 cell들을 골라내기 위한 Gene. Host Cell에 영향 없는 antibiotics 사용
ex) Ampicilin
Restriction sites (=MultiCloning Site; MCS)
- Cloning 할 때 Restriction enzyme이 사용되는 부위이며 다양한 Restriction enzyme이 사용됨. 우리가 넣어줄 Gene들이 들어감.
Restricion enzyme ex) ECoR1, BamH1, Kpn 1
Origin of Replication
- Bacteria에 Transformation 된 후 Bacteria에서 복제가 시작되는 지점
Promoter
- Host cell에 주입된 후 Inserted gene을 발현시키기 위해 필요한 element. RNA발현 또는 단백 발현을 위함
ex) CMV
Vector에는 이것 외에도 수많은 element들이 존재합니다.
Vector의 element에 대해서는 다음에 또 포스팅을 진행하도록 하겠습니다~
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